毛細(xì)管電泳的類型主要有三種:毛細(xì)管區(qū)帶電泳、毛細(xì)管等電聚焦電泳、毛細(xì)管凝膠電泳。毛細(xì)管電泳一般包括三個(gè)步驟:電泳柱的制備,平衡;進(jìn)樣;電泳分析。其電泳柱的制備方式不同于前面所介紹的任何電泳;其進(jìn)樣方式也不同于常規(guī)電泳,而采用流體力學(xué)方式,與HPLC的相似;其電泳分析也不同于常規(guī)電泳的染色后分析,而采用在線分析。
毛細(xì)管電泳的主要特點(diǎn)是柱效更高,分析更快,操作靈活、多樣。在毛細(xì)管電泳中,擴(kuò)散對(duì)分辨率的影響可以忽略,而毛細(xì)管內(nèi)的電滲、樣品同管 壁的吸附作用則是影響分離效率的兩個(gè)主要因素。由于毛細(xì)管內(nèi)壁表面帶有離子化基團(tuán),使得管壁不同程度地吸引樣品分子,造成非均一性電滲流而影響分離。為此,可以通過(guò)使蛋白質(zhì)與管壁的硅羥基都不帶電或都帶負(fù)電荷來(lái)改善這種吸附和電滲情況,但更有效的解決方法是對(duì)毛細(xì)管內(nèi)壁進(jìn)行改性。因此在毛細(xì)管電泳中,毛細(xì)管電泳柱的制備是一個(gè)重要環(huán)節(jié),其制備主要包括鍵合涂層和吸附涂層。通過(guò)對(duì)石英毛細(xì)管內(nèi)壁進(jìn)行涂層處理,能有效地減少毛細(xì)管內(nèi)壁對(duì)蛋白質(zhì)的吸附作用,從而抑制電滲,提高柱效,改善分離效果,如常見(jiàn)的硅烷化處理。
毛細(xì)管電泳的主要特點(diǎn)是柱效更高,分析更快,操作靈活、多樣。在毛細(xì)管電泳中,擴(kuò)散對(duì)分辨率的影響可以忽略,而毛細(xì)管內(nèi)的電滲、樣品同管 壁的吸附作用則是影響分離效率的兩個(gè)主要因素。由于毛細(xì)管內(nèi)壁表面帶有離子化基團(tuán),使得管壁不同程度地吸引樣品分子,造成非均一性電滲流而影響分離。為此,可以通過(guò)使蛋白質(zhì)與管壁的硅羥基都不帶電或都帶負(fù)電荷來(lái)改善這種吸附和電滲情況,但更有效的解決方法是對(duì)毛細(xì)管內(nèi)壁進(jìn)行改性。因此在毛細(xì)管電泳中,毛細(xì)管電泳柱的制備是一個(gè)重要環(huán)節(jié),其制備主要包括鍵合涂層和吸附涂層。通過(guò)對(duì)石英毛細(xì)管內(nèi)壁進(jìn)行涂層處理,能有效地減少毛細(xì)管內(nèi)壁對(duì)蛋白質(zhì)的吸附作用,從而抑制電滲,提高柱效,改善分離效果,如常見(jiàn)的硅烷化處理。
毛細(xì)管電泳的另一主要特點(diǎn)是它能實(shí)現(xiàn)在線檢測(cè),其檢測(cè)器主要有紫外可見(jiàn)光檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器和激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器,三者的檢測(cè)靈敏度不斷提高,但后兩者需對(duì)樣品進(jìn)行衍生化處理。
采用毛細(xì)管進(jìn)行電泳分離,由于毛細(xì)管自身的抗對(duì)流作用,使得凝膠介質(zhì)不再是必需的,特別是可以對(duì)樣品進(jìn)行快速、高效分離,能夠?qū)崿F(xiàn)
在線檢測(cè)和自動(dòng)化操作,因此它已成為一種高效分離技術(shù),并常與質(zhì)譜等分析儀器聯(lián)用,實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品的快速、高效分離分析。毛細(xì)管電泳的分離原理同常規(guī)電泳。