實(shí)時(shí)熒光定量PCR 儀的工作原理
實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀主要由樣品載臺(tái)、基因擴(kuò)增熱循環(huán)組件、微貸熒光檢割光學(xué)系統(tǒng)、微電路控制系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)及應(yīng)用軟件組成。樣品載臺(tái)的容量常見的是36孔、48孔、96孔、384孔。
基因擴(kuò)增熱循環(huán)組件工作原理與傳統(tǒng)基因擴(kuò)增儀大致相同,不同廠家不同型號(hào)的產(chǎn)品分別采用空氣加熱、壓縮機(jī)制冷、半導(dǎo)體加熱制冷等工作方式。微量熒光檢測系統(tǒng)由熒光激發(fā)光學(xué)部件、微拯熒光檢測部件、光路、控制系統(tǒng)組成。常用的熒光激發(fā)方式有兩種: 鹵鴿燈和LED;熒光檢測元件常用兩種方式: 光電倍培管和冷光CCD 攝像機(jī). 光單色元件有濾光片和光柵。探測光路設(shè)計(jì), 有的廠家采用步進(jìn)電機(jī)加導(dǎo)軌的裝置帶動(dòng)探測器的檢測位置來測量每個(gè)樣本的熒光。
配套的計(jì)算機(jī)和軟件提供熱循環(huán)編程、數(shù)據(jù)分析、熱循環(huán)溫度和熒光值實(shí)時(shí)監(jiān)測圖形顯示、數(shù)據(jù)庫管理等功能。