色譜（三）：色譜基礎(chǔ)知識&專業(yè)詞匯知多少！
一、保留時間與容量因子
在整個色譜分離過程中，流動相始終是以一定的流速（或壓力）在固定相中流動的，并將溶質(zhì)帶入色譜柱。溶質(zhì)因分配、吸附等相互作用，進入固定相后，即在固定相表面與功能層分子作用，從而在固定相中保留。同時，溶質(zhì)又被流動相洗脫下來，進入流動相。與固定相作用越強的溶質(zhì)在固定相中的保留時間就越長。
從色譜柱流出的溶液（柱流出物）進入檢測器連續(xù)測定，得到如圖7-1所示的色譜圖，即柱流出物中溶質(zhì)濃度隨時間變化的曲線，直線部分是沒有溶質(zhì)流出時流動相的背景響應(yīng)值，稱作基線（base line）。在基線平穩(wěn)后，通常將基線響應(yīng)值設(shè)定為零，再進樣分析。溶質(zhì)開始流出至完全流出所對應(yīng)的峰型部分稱色譜峰（peak），基線與色譜峰組成了一個完整的色譜圖（chromatogram）。
1）死時間(dead time)
2）溶質(zhì)保留時間（solute retention time）
3）保留時間（retention time）
4）容量因子（capacity factor）
1）死時間(dead time)： 在色譜柱中無保留的溶質(zhì)從進樣器隨流動相到達(dá)檢測器所需要的時間，通常用t0表示。
2）溶質(zhì)保留時間（solute retention time）： 或稱真實保留時間，是溶質(zhì)因與固定相作用在色譜柱中所停留的時間，它不包含死時間，通常用tS表示。
3）保留時間（retention time）： 是tS與t0之和，通常用tR表示，即
tR = t0 + tS (1)
4）容量因子（capacity factor）： 對于有效的色譜分離，色譜柱必須具有保留溶質(zhì)的能力，而且還能使不同溶質(zhì)之間達(dá)到足夠大的分離。色譜柱的容量因子是溶質(zhì)離子與色譜柱填料相互作用強度的直接量度，由下式定義：
(2) 式中VR 和V0 分別為總保留體積和空保留體積。
圖1 色譜圖與保留時間概念
二、 色譜峰的對稱性
1）高斯（Gaussian）曲線
2）不對稱因子（asymmetry）
3）拖尾峰（tailing peak）
4）伸舌峰（leading peak或fronting peak）
1）高斯（Gaussian）曲線： 在理想情況下，色譜峰的形狀可以近似地用高斯曲線描述（圖3）。圖中為標(biāo)準(zhǔn)偏差（拐點處的半峰寬），h為最大峰高，w為峰寬。
圖2 高斯曲線
在任意給定位置x處的峰高y可以用下式描述：
(3)(式中Y0為峰極大值，即Y0=h）
2）不對稱因子（asymmetry）： 在實際的色譜過程中，溶質(zhì)從色譜柱中流出時，很少符合高斯分布，而是具有一定的不對稱性。我們可以定義一個不對稱因子As來定量地表示色譜峰的不對稱程度，如圖7-3所示，將10％峰高處前半峰的寬度設(shè)為a, 同高度處后半峰的寬度設(shè)為b，將b與a的比值定義為不對稱因子As，即
As=b/a (4)
3）拖尾峰（tailing peak）： 當(dāng)As大于1時，色譜峰的形狀是前半部分信號增加快，后半部分信號減少慢。引起峰拖尾的主要原因是溶質(zhì)在固定相中存在吸附作用，因此，拖尾峰也稱為吸附峰。
4）伸舌峰（leading peak或fronting peak）： 當(dāng)As小于1時，色譜峰是前半部分信號增加慢，后半部分信號減小快。因為伸舌峰主要是固定相不能給溶質(zhì)提供足夠數(shù)量合適的作用位置，使一部分溶質(zhì)超過了峰的中心，即產(chǎn)生了超載，所以也稱超載峰。
圖3 不對稱因子的定義
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