根據(jù)《 湖南省市場監(jiān)督管理局關(guān)于下達2019年地方標(biāo)準(zhǔn)制修訂項目增補計劃的通知》的要求,由湖南省獸藥飼料監(jiān)察所等單位組織制定的湖南省地方標(biāo)準(zhǔn)《黃曲霉毒素B1快速檢測 超導(dǎo)量點免疫熒光法》已完成征求意見稿,根據(jù)《地方標(biāo)準(zhǔn)管理辦法》的要求,現(xiàn)面向社會公開征求意見。請有關(guān)單位進行討論、填寫《征求意見反饋表》。請于2020年8月28日前將意見反饋至湖南省獸藥飼料監(jiān)察所。感謝您的參與和支持。電子郵箱:642055795@qq.com
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節(jié)選該標(biāo)準(zhǔn)部分內(nèi)容:
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了飼料中黃曲霉毒素B1的超導(dǎo)量點免疫熒光快速定量法的原理、試劑、材料、儀器設(shè)備、樣品制備、樣品測定與結(jié)果表述。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于我省植物性飼料原料、配合飼料、濃縮飼料中黃曲霉毒素B1的快速檢測。
原理
本方法基于超導(dǎo)量點標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng),采用熒光側(cè)向免疫層析方法學(xué)原理。試樣提取液中的黃曲霉毒素B1與檢測卡上標(biāo)記的抗體相結(jié)合并發(fā)出熒光,熒光強度與試樣中黃曲霉毒素B1含量相關(guān)。層析結(jié)束后,用免疫熒光分析儀測定檢測卡上的檢測線和控制線的熒光強度,儀器根據(jù)內(nèi)置標(biāo)準(zhǔn)曲線自動算出試樣中黃曲霉毒素B1的含量。
試劑與材料
除另有說明外,所用試劑均為分析純,實驗室用水應(yīng)符合GB/T 6682中三級水的要求。
稀釋緩沖液:由超導(dǎo)量點免疫熒光定量檢測卡配套提供,或根據(jù)產(chǎn)品使用說明書配制。
4提取液:量取550mL甲醇加入450mL水中,混勻。
儀器與設(shè)備
天平:分度值0.01g。
粉碎機:可使試樣粉碎后全部通過20目篩。
離心機:轉(zhuǎn)速不低于4000 r/min。
渦旋振蕩器。
免疫熒光分析儀:可測定并顯示超導(dǎo)量點免疫熒光定量檢測卡的測定結(jié)果。
黃曲霉毒素B1超導(dǎo)量點免疫熒光定量檢測卡:常溫避光儲存,具體儲存條件參照使用說明;技術(shù)要求見附錄A。
濾紙:采用中速定量濾紙。
計時器。
樣品測定
開啟免疫熒光分析儀(5.5)。
將超導(dǎo)量點免疫熒光定量檢測卡(5.6)取出,加樣孔朝上平放。
準(zhǔn)確移取75μL待測液(6.2.2),加入檢測卡加樣孔中。
檢測卡加樣后,水平靜置15 min反應(yīng),然后在3 min內(nèi)將檢測卡插入免疫熒光分析儀(5.5),儀器將自動進行檢測。
免疫熒光分析儀(5.5)將在13秒內(nèi)完成數(shù)據(jù)讀取、分析,免疫熒光分析儀自動顯示試樣中黃曲霉毒素B1的含量并保存檢測結(jié)果。
若免疫熒光分析儀的顯示值>50 μg/kg,需移取100 μL 6.2.2中濾液或上清液,加入300 μL試樣提取液(4.2),充分混勻后取100 μL至一潔凈的離心管中,加入400 μL稀釋緩沖液(4.1),充分混勻,按照7.2~7.5進行測定。
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