4、新柱使用前的平衡和老化
廠家出廠檢驗時一般都已進行過平衡，但色譜柱到最終用戶時間不一，用戶正式測定前最好對色譜柱再次平衡。最好的平衡兼老化一起進行的方法是運行幾次完整的分析程序（包括進樣），直到觀察到峰形、保留時間和峰面積穩(wěn)定為止。所謂“老化”是借用了氣相的術(shù)語，目的是達到分析物在色譜柱以及整個液相系統(tǒng)流路中的吸附飽和。對某些特定的待測物，如分子量大于1000的，因擴散速度慢，老化時間相應(yīng)要長，可采取大濃度進樣或在同一個洗脫周期內(nèi)連續(xù)進樣多針的方式加快老化。
5、pH使用范圍
一般認(rèn)為硅膠基質(zhì)柱子的pH使用范圍是2-8，這是很粗略的。硅膠類型、使用溫度、硅膠表面所鍵合的固定相類型以及緩沖鹽的不同，對此均有影響。硅膠比孔容小、鍵合密度大的填料pH耐受范圍要大一些，有些選用高品質(zhì)硅膠，加上高密度鍵合和雙封尾，或特殊工藝使pH耐受范圍最大提高到10。磷酸鹽緩沖鹽滲透力強，有加快硅膠溶解的副作用，它的存在會降低pH使用范圍。有機雜化硅膠以及硅膠表面涂覆雜化層的硅膠填料，有機質(zhì)的存在使pH使用范圍能到12以上。拿到柱子第一時間閱讀說明書，確認(rèn)色譜柱內(nèi)的封存液，有條件可以依照COA報告做柱效測試。
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6、色譜柱保存
短期保存(隔夜或隔周末)用所用的流動相（不含緩沖鹽）保存為佳，以盡量減少下次使用的平衡時間。一般只建議在長期保存反相柱的時候用純甲醇或乙腈，一方面純有機相保存有最大限度減少鍵合相水解的作用，但純甲醇（乙腈）又會將已水解而暫時吸附在柱內(nèi)的鍵合相洗脫出去，使固定相流失進程加快，壽命縮短。純有機相保存還有易揮發(fā)使柱床變干的缺點，使用80%左右有機相保存也屬好的選擇，且足以避免長菌。強烈建議在柱身上貼標(biāo)簽標(biāo)明保存溶劑。
離子交換柱和水性SEC柱等適合保存在水溶液中的色譜柱，可加0.05%疊氮化鈉溶液防止長菌。
正相柱，無論是短期還是長期，都推薦保存在所用流動相中。
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