液相色譜堵塞原因分析
堵在液相色譜使用過程中是經常出現(xiàn)的,今天我們一起來探究一下HPLC常見堵塞原因有哪些,了解故障發(fā)生的原因,既可以在碰到堵塞故障時不至于束手無策,又可以防微杜漸,防患于未然。
1 避免長菌
在夏季很容易滋生微生物或藻類,長期這么使用,溶劑過濾頭、管路、脫氣機、比例閥、色譜柱等容易損壞,不僅維修費用高,還耽誤實驗進度。小長假儀器長期不使用時,需要把使用水相的管路用有機相置換,防止長菌。
2 規(guī)范使用流動相
流動相要臨用現(xiàn)配,貼好標簽,寫明有效期,配置日期等。使用色譜級試劑,盡量使用0.2μm濾膜過濾含鹽流動相,使用0.45μm濾膜過濾有機相,注意溶劑與濾膜的兼容性。
進行梯度實驗時要注意梯度變化過程中流動相的互溶性,不能互溶的溶劑不可以直接切換,使用異丙醇作為過渡溶劑切換。使用緩沖鹽的流動相時注意過渡,不要直接使用高有機相沖,避免鹽析,并注意清洗泵柱塞桿。對于等度純鹽相實驗如Ch.P中磷酸肌酸鈉項目,建議小哥哥小小姐姐們可以將配置好的流動相在冰箱中冷藏,半天后更換放置至室溫的新的流動相。其他等度條件水相與有機相預混后上機,不要用泵比例閥在線混合。
3 正確使用乙腈
乙腈可以聚合,在常溫光照的條件下就可以緩慢的聚合,這種聚合體會逐漸沉積在入口單向閥的寶石球上面,從而影響泵的精度,所以在使用乙腈的時候要注意:
○ 乙腈盡量現(xiàn)用現(xiàn)倒,勤換新。
○ 最好用棕色的瓶子裝乙腈,避免陽光直射。
○ 保持乙腈清潔,塵埃或者其他雜質可能成為聚合物形成的“凝結核”。
○ 如果閥已經被乙腈聚合物給粘住了,可以用熱水-異丙醇沖洗管路,或者超聲處理,可以溶解聚合物。
4 樣品前處理不能少
樣品基質比較復雜的情況下,樣品的凈化過濾就更重要了,樣品處理不好,容易堵進樣口及色譜柱。樣品要過濾后上機。
5選用優(yōu)質的耗材
進樣瓶及蓋墊選擇不合適,可能對實驗結果造成影響,更嚴重的會對儀器造成損毀,如下圖中因為進樣瓶蓋選擇不正確,導致進樣針扎彎。
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